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影响elisa试剂盒测定成果的原因和解决办法
来源于:上海联硕生物科技有限公司,浙江联硕生物科技有限公司 | 发布时间:2020/7/15 8:58:00

elisa试剂盒方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定,具有灵敏度高,操作简略等优点,但是在详细实验过程中影响要素较多,而且要按照严厉的阐明要求,在临床检验中除正常反响外,有时常可见到一些错误成果(即假阳性或假阴性成果)。
影响elisa测定错误成果的原因主要有:
标本要素;
试剂要素;
操作要素。
一、类风湿因子
人血清中igmigg型类风湿因子(rf)能够与elisa系统中的捕获抗体及酶符号二抗的fc段直接结合,然后导致假阳性。
解决办法:
1.fab2替代完好的igg
2.标本用联有热变性(63℃10 minigg的固相吸附剂处理(将热变性igg加入到标本稀释液中同样有用);
3.检测抗原时,能够用2-巯基yi醇等加入到标本稀释液中,使rf降解。
二、补体
elisa系统中固相一抗和符号二抗过程中,抗体分子发作变构,其fc段的补体c1q分子结合位点被暴露出来,使c1q 能够将二者连接起来,然后形成假阳性。
解决办法:
1.edta稀释标本;
2.53℃10 min56℃30 min加热血清使c1q灭活。
三、嗜异性抗体
人类血清中含有能与啮齿类动物(如鼠等)igs) 结合的天然嗜异性抗体,可将elisa系统中一抗和二抗连接起来,也能形成假阳性。
解决办法:
可在标本稀释液中加入过量的动物igs),但加入量不足或亚类不同时无效。
四、嗜靶抗原的本身抗体
抗甲状腺球蛋白、抗胰岛素等嗜靶抗原的本身抗体,有时能与靶抗原结合形成复合物,在elisa方法中均可干扰抗原抗体测定成果。
解决办法:
测定前需用理化方法将其解离后再测定。

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